灵芝知识网 多糖类（Polysaccharides）成分
多糖类是灵芝属的重要生物活性物质之一。药理研究表明：从不同灵芝种类中分离出的多糖均具有抗作用、免疫调节作用、降作用、降作用、作用及抗作用等，是当前一个很热门的研究课题。
全世界灵芝属种类很多，就其多糖类研究主要以灵芝（赤芝、紫芝）研究居多，树舌、松杉灵芝（松杉树芝）虽有研究，相对较少，以日本、中国（台湾）、印度尼西亚、韩国、新加坡等研究较多，发展不平衡。总的来说，多糖研究的广度、深度不如三萜类化合物。
灵芝多糖的药理活性与单糖连接方式、位置有关，通常单糖以1→3、1→6糖苷键连接的多糖具有药理活性，而纯1→4糖苷键连接的则不显示活性。多糖的药理活性，还与其组成的立体构型有关，若螺旋状结构破坏，其药理活性则明显降低。单糖之间的苷键，大多为1→3、1→4、1→6数种，多数为β-构型结构，少数为α-构型结构。在多数β-构型多糖分子中有分支部分，灵芝多糖含有15%-30%的肽，多糖链分枝密度高或含有一定量肽成分，其生理活性也较强。因此，多糖的构型与药理活性关系十分密切。利用研究多糖，首先应采用不同提取方法提纯，加以深入研究，才能比较透彻地了解多糖生物活性的本质。
组成灵芝多糖的单糖类型以葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖为主，还有少量岩藻糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、海藻糖等，少数多糖由单一葡萄糖组成。由于多糖的结构复杂，不同种类的灵芝菌，不能简单地用某种方法就可确定，必须采用多种方法、多种手段配合使用，将全部有关信息进行综合分析，才能较准确测定获得它的初级结构（一级结构），而它们的高级结构的研究就相对困难，就目前分离技术和研究手段的限制，对多糖类的研究，还不像三萜酸一样研究得透彻，这也说明为什么多糖研究深度和广度不够的原因。
一、灵芝中的多糖
1971年Sasaki T等[58]从树舌子实体中分离出抗S-180肉瘤的活性多糖G-D、G-F、G-Z。经化学研究表明，该多糖中G-Z为β-（1→3）（1→4）连接的葡聚糖，并有微量木糖存在。1981年东京药学院Miyazaki T等[60]从灵芝子实体（fruit body of Ganoderma lucidum）分离出水溶性多糖GL-1，分子量为40000，GL-1由葡萄糖、木糖及阿拉伯糖组成，其分子比为18.8∶1.5∶1.4，主要成分为阿拉伯葡聚糖（arabinoyloglucan）侧链含α及β（1→4）D-吡喃葡萄糖基，β（1→6）及β（1→3）连接，阿拉伯糖为非还原性末端残基，木糖可能作为侧链的部分存在。GL-1对S- 180肉瘤有强烈的抑制作用（当ip注射20mg·kg-1·10d），其抑制率为95.6%-98.5%，温和酸水解及α-淀粉酶处理，GL-1对抗则没有效果。结果表明：GL-1抗的重要结构为侧链葡聚糖核心含有β-（1→3）及β-（1→4）及β-（1→6）连接。
1982年Miyazaki T等[59]以稀碱液（0.1M NaOH）从灵芝中提取分离出抗S-180肉瘤活性的水溶性多糖，分子量38000，经酸水解鉴定，该多糖含有L-岩藻糖、D-木糖和D-甘露糖，其分子比为1∶1∶1，经过碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解、甲基化反应及气质（GC-MS）联用，证明其结构为：
→4）-D-甘露糖（1→4）→D-甘露糖（1→4）-D-甘露糖（1→
3 3 3
↑ ↑ ↑
1 1 1
D-木糖 D-木糖 D-木糖
4 4 4
↑ ↑ ↑
L-岩藻糖 L-岩藻糖 L-岩藻糖
1983年Ukai S等[77]从日本产紫芝（Ganoderma japonicum）中分离出甘露多糖（Mannan）及水溶性葡聚糖（glucans）对S-180肉瘤显示抗活性。
1985年Hikino H等[61]从日本Kanagawa产的灵芝（Ganoderma lucidum Karst）的生药中分离出葡聚糖肽（peptidoglycans），灵芝葡聚糖A及B。临床观察有降的活性。
1986年Tomoda K等[63]从灵芝（Ganoderma lucidum (reishi) Kasten）子实体分离出降成分，即灵芝葡聚糖B和C。研究表明葡聚糖肽（peptidoglycans），分子量分别为7400及5800。灵芝葡聚糖B的侧链含D-吡喃葡萄糖基β（1→3）（1→6）苷键连接。灵芝葡聚糖C（ganoderan C）含吡喃葡萄糖基β（1→3）（1→6）及D-吡喃半乳糖基α-（1→6）苷键。
1986年韩国汉城大学Shin H W等[62]从灵芝鹿角状孢子及菌盖（Ganoderma lucidum pileus）鹿角状（horn-shaped carpo spore）进行分析，从其子实体分离出蛋白质多糖，经热水提取，丙酮沉淀及透析纯化得到多糖部分（51%）及蛋白质部分（5%），当ip 50mg·kg-1小鼠上，可增强腹膜渗出物细胞（巨噬细胞）多形核蛋的积累，表明该糖蛋白具有免疫潜在活性。
1997年Hitoshi T等[64]从灵芝中提取4种多糖，腹腔注射对小鼠肉瘤S-180的抑制率达83黄瓜的营养优势主要是由黄瓜皮“味甘、性平”的本质所决定的，所以能够清热、生津止渴，尤其能、清肠、养颜。因此，生吃黄瓜好连皮一起吃，不仅有上述好处，还能使维生素C得到充分吸收，促进人体新陈。 ■温馨提示：代谢从而有效。.9%，半数动物完全消退，该灵芝的抗活性成分，似为含少量蛋白质的多糖。
1992年北京医科大学药学院何云庆等[65]研究了灵芝子实体免疫多糖。从中分离出4种成分，其中1种具有（1→6）及（1→3）连接的葡萄糖多聚体。另1种为β（1→6）（1→3）连接的阿拉伯糖及半乳糖的多聚体。
1993年Kim B等[66]从朝鲜产灵芝（Ganoderma lucidum）培养的菌丝体热水提取物中，发现与蛋白质结合的多糖Fr1-V，静脉注射ICR鼠，剂量为20mg·kg-1/d（V），对S-180肉瘤，抑制率为64.2%-75.8%，并对抗化合物测定了免疫活性。它含有68.6%的多糖，系由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、木糖及51%蛋白质（17种氨基酸组成，分子量为5.8×104道尔顿，命名为灵芝多糖（lucidan）。
1993年林志彬和雷林生[67][29]发现，每日给小鼠腹腔注射灵芝多糖GL-B（25-100mg·kg-1）4天。可明显增强小鼠脾细胞对LPS刺激的增殖反应。当剂量为100mg·kg-1时，脾细胞增殖反应较对照组增加84.8%。结果表明，GL-B可增强B淋巴细胞对LPS刺激的敏感性。
1991年Ma等[29]报告灵芝多糖BN3A、BN3B和BN3C（0.05-1μg·ml-1）均可显著增加C57 BI/6j 小鼠脾细胞在Con A存在条件下的IL-2产生，并可部分地拮抗环孢霉素A和氢化可的松对小鼠脾细胞产生IL-2的抑制作用。
1994年何云庆等[68]从人工栽培的灵芝（赤芝）（Ganoderma lucidum(Leyss. Fr)Karst）子实体热水提取物中分离出2种葡聚糖肽GLSP1、GLSP2，凝胶层析及高效液相证明其为单一的多糖均一体，测得分子量分别为12800及14100，完全水解、过碘酸氧化、Smith降解、光谱分析及甲基”《随息居饮食谱》亦云：“清热消痰。行瘀化积。”故瘰疬之人宜食之。紫菜能化痰、软坚、清热、消瘰疬。《食物与便方》中即有介绍：颈项瘰疬。包括淋巴结肿大等。每天用紫菜泡汤。当菜汤佐膳。连吃1-2个月。凡瘰疬久不消溃者宜服。化分析表明：GLSP1为含有β（1→3）（1→6）及（1→4）苷键的葡聚糖肽，肽的含量占26.6%；GLSP2为含有β（1→6）及（1→4）苷键的葡聚糖肽，两类苷键糖基组成比例1∶1，并有分枝，肽的含量占12.3%，碱性β-消去反应证明，2种葡聚糖肽的糖基与肽键的丝氨酸与苏氨酸以O-糖苷键相连接。
1989年Hikino等[69]从灵芝子实体中分离出蛋白质的异多糖FA-1b, FIII-3a，共15种，其中，除FII-1无降作用，FIII-1b降作用较弱外，对正常小鼠均有明显降糖作用。
灵芝多糖B（ganoderan B）能提高正常小鼠和糖负荷小鼠浆水平，灵芝多糖B可明显促进葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶、葡萄糖-6-磷酸和糖原合成酶活性，降低葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性。
1989年何云庆等[70]从赤芝（灵芝）子实体分离出一种具有促进核酸蛋白合成代谢作用、改善造功能的多糖BN3C（polysaccharide BN3C），从中分离出4种多糖均一体，经用现代研究方法确认，BN3C为葡聚糖，由葡萄糖、阿拉伯糖的肽多糖（peptidopolysaccharide）组成，葡萄糖与阿拉伯糖的摩尔数比为4∶1，肽的含量为5.4%，由胱氨酸（cystine）、亮氨酸、酪氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid）及微量精氨酸、赖氨酸（Lysine）、蛋氨酸、组氨酸（histidine）所组成。
1989年Hikino H, Mizuno T等[71]从灵芝子实体提取分离出蛋白质的异多糖FA-1 b-F111-3a，共15种，其中F11-1无降作用，F111-1b降作用较弱外，对正常小鼠均有明显降作用。肽多糖灵芝多糖B（ganoderan B）能提高正常小鼠和糖负荷小鼠浆水平，灵芝多糖B可明显促进葡萄糖激酶，磷酸果糖激酶，葡萄糖-6-磷酸和糖原合成酶活性，降低-6-磷酸氢酶活性。
1995年Ma及Lin[73]发现，在给小鼠腹腔接种S-180细胞前给药或接种后给药，灵芝多糖肽50mg·kg-1、100 mg·kg-1和200mg·kg-1连续灌胃7-9日，可显著延长小鼠的存活时间，同样剂量的灵芝多糖肽还可抑制小鼠皮下接种的S-180生长，抑制率分别为21.7%、38.5%和35.5%，给荷Lewis小鼠连续灌胃灵芝多糖肽50 mg·kg-1，共9日，也可显著地抑制Lewis生长，抑制率为55.5%。
1996年Kweon M H等[78]从朝鲜产灵芝（G. lucidum）热水提取物分得抗凝固多糖蛋白。
2002年倪江洪等对灵芝孢子破壁前后多糖提取率进行了比较，结果如下：
表5-11 灵芝孢子破壁前后多糖提取率
供试品
提取率（%）
未破壁
机械破壁
酶法破壁
1.13
1.16
2.14
据文献记载[81]，用不同材根据口感加入适白糖，滤液中加凉开水，溶液体积补充至1000毫升，如有沉淀再过滤。装瓶(100毫升／瓶)，30分钟灭菌即成。料如木枹栋、青岗栋和锯末栽培的灵芝子实体，其多糖的抗活性基本相同，各种培养料上生长的灵芝子实体， 开伞前子实体中多糖的抗活性均较低（抑制率仅为22%-33%），而开伞后，成熟期和成熟后期的子实体中多糖的抗活性均较高（抑制率达83%-99%），不同产地的灵芝中多糖含量不同。北京医科大学药学院李晓晖等的研究结果见表5-12。
表5-12 不同产地、外形的灵芝中多糖含量[81]
供试品名称
外形
部位
多糖含量（%）
泰山灵芝
泰山灵芝
泰山灵芝
泰山灵芝
北京灵芝
北京灵芝
鹿角状
鹿角状
云头状
云头状
鹿角状
云头状
子实体菌盖
子实体菌盖
子实体
子实体
子实体
子实体
1.14
1.03
1.58
1.34
1.61
0.90
上述结果表明，不同产地的同种灵芝由于其人工栽培条件的不同，会导致多糖含量的差异。鹿角状灵芝中的多糖含量不一定低于云头状灵芝中的多糖含量。多糖的生物活性既与各种单糖连接方式有关，也与糖的组成、糖苷（1→3）、（1→4）及（1→6）连接，有无侧链、构型及构象等有关，还与灵芝的种类，生态条件，提取方法等息息相关。因此，探讨灵芝多糖结构、构型与活性之间的关系很有必要。
表5-13 部分灵芝多糖的化学结构与分子量[29]
名称
化学结构
分子量
来源
灵芝多糖A
（ganoderan A）
杂多糖肽
（Rha∶Gal∶Glc=0.4∶1.0∶0.7）
2.3×104
G. lucidum
灵芝
灵芝多糖B
（ganoderan B）
酸性杂多糖肽（Man∶Glc=0.05∶1.0）(Glc A∶Gal A=0.7∶1.0)
7.4×104
G. lucidum
灵芝
灵芝多糖B
β（1→3）（1→6）葡聚糖肽
7.4×103
G. lucidum
灵芝多糖C
β（1→3）（1→4）半乳葡聚糖肽
5.8×103
G. lucidum
BN3B1
β（1→3）（1→6）葡聚糖
3.4×104
G. lucidum云头状
BN3B3
β（1→6）（1→3）阿拉伯半乳聚糖
4.0×104
G. lucidum云头状
BN3C1
β（1→6）（1→3）葡聚糖
1.6×104
G. lucidum云头状
BN3C3
β（1→6）（1→3）阿拉伯葡聚糖肽
2.5×104
G. lucidum云头状
F-1-1α1-β
β（1→3）为主链（1→6）为支链的葡聚糖
1.01×105
G. applanatum树舌
F-1-1α2-β
β（1→3）为主链（1→6）为支链的葡聚糖
3.02×105
G. applanatum树舌
GLA4
β（1→3）（1→6）（1→4）葡萄糖为主的杂多糖（Glc∶Xyl=4∶1）
1.30×104
G. lucidum鹿角状
GLA7
β（1→3）（1→6）（1→4）葡萄糖为主的杂多糖（Glc∶Ara∶Xyl∶Gal=46∶3∶2∶1）
1.2×104
G. lucidum鹿角状
GLSP2
β（1→3）（1→6）（1→4）葡聚糖肽
1.28×104
G. lucidum鹿角状
GLSP3
β（1→6）（1→4）葡聚糖肽
1.41×104
G. lucidum鹿角状
GLB2
β（1→4）（1→6）葡聚糖
7.1×103
G. lucidum鹿角状
GLB3
β（1→4）（1→6）杂多糖（Man∶Glc=1.0∶1.3）
7.7×103
G. lucidum鹿角状
GLB4
β（1→4）杂多糖（Ara∶Xyl∶Glc∶Gal=1.9∶1.2∶0.4∶3.6∶1.0）
9.0×103
G. lucidum鹿角状
GLB6
β（1→4）杂多糖
8.8×103
G. lucidum鹿角状
GLB7
β（1→4）（1→6）杂多糖（Ara∶Xyl∶Man∶Glc∶Gal=0.3∶0.2∶0.6∶2.6∶1.0）
9.0×103
G. lucidum鹿角状
GLB9
β（1→4）半乳葡聚糖（Gal∶Glc=1.0∶1.7）
9.3×103
G. lucidum鹿角状
名称
化学结构
分子量
来源
GLB10
β（1→4）为主及少量β（1→6）的葡聚糖